2017-09-08连翘

连翘
一、连翘药典标准     本品为木犀科植物连翘Forsythia suspensa （Thunb.） Vahl的干燥果实。秋季果实初熟尚带绿色时采收，除去杂质，蒸熟，晒干，习称“青翘”；果实熟透时采收，晒干，除去杂质，习称“老翘”。
    【性状】  本品呈长卵形至卵形，稍扁，长1.5～2.5cm，直径0.5～1.3cm。表面有不规则的纵皱纹和多数突起的小斑点，两面各有1条明显的纵沟。顶端锐尖，基部有小果梗或已脱落。青翘多不开裂，表面绿褐色，突起的灰白色小斑点较少；质硬；种子多数，黄绿色，细长，一侧有翅。老翘自顶端开裂或裂成两瓣，表面黄棕色或红棕色，内表面多为浅黄棕色，平滑，具一纵隔；质脆；种子棕色，多已脱落。气微香，味苦。
    【鉴别】  （1）本品果皮横切面：外果皮为1列扁平细胞，外壁及侧壁增厚，被角质层。中果皮外侧薄壁组织中散有维管束；中果皮内侧为多列石细胞，长条形、类圆形或长圆形，壁厚薄不一，多切向镶嵌状排列。内果皮为1列薄壁细胞。
    （2）取本品粉末1g，加石油醚（30～60℃）20ml，密塞，超声处理15分钟，滤过，弃去石油醚液，残渣挥干石油醚，加甲醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘对照药材1g，同法制成对照葯材溶液。再取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（8：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
    【检查】  杂质 青翘不得过3%；老翘不得过9%（通则 2301）。
    水分 不得过10.0%（通则0832第四法）。
    总灰分 不得 过4.0% （通则2302）。
    【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的冷浸法测定，用65%乙醇作溶剂，青翘不得少于30.0%；老翘不得少于16.0%。
    【含量测定】  连翘苷 照高效液相色谱法（通则0512） 测定。
    色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相；检测波长为277nm。理论板数按连翘苷峰计算应不低于3000。
    对照品溶液的制备  取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含O.2mg的溶液，即得。
    供试品溶液的制备  取本品粉末（过五号筛）约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，称定重量，浸渍过夜，超声处理（功率250W，频率40kHz）25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸至近干，加中性氧化铝0.5g拌匀，加在中性氧化铝柱（100～120目，1g，内径为1～1.5cm）上，用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含连翘苷（C27H34O11）不得少于 0.15%。
    连翘酯苷A  照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%冰醋酸溶液（15：85）为流动相；检测波长为330nm。理论板数按连翘酯苷A峰计算应不低 于5000。
    对照品溶液的制备  取连翘酯苷A对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得（临用配制）。
    供试品溶液的制备  取本品粉末（过五号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇15ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
     测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含连翘酯苷A（C29H36O15）不得少于0.25%。
    【性味与归经】  苦，微寒。归肺、心、小肠经。
    【功能与主治】  清热解毒，消肿散结，疏散风热。用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热入营，高热烦渴，神昏发斑，热淋涩痛。
    【用法与用量】  6～15g。
    【贮藏】  置干燥处。


二、连翘化学成分
果实含木脂体类化合物：连翘苷（forsythin，phillyrin）[1]，连翘素（phillygenin），右旋松脂酚 （pinoresin－ol）[2,3]，右旋松脂醇葡萄糖甙（pinoresinol-β-D-glucoside）[3,4]；黄酮类化合物：芦丁（rutin）[2,4]；苯乙烷类衍生物：连翘脂苷A（forsythoside）、连翘脂苷C、连翘脂苷D、连翘脂苷E[5]，连翘种苷（suspensaside）[6]，红景天苷（salidroside）[5]；乙基环己醇类衍生物：（木来）木甙（cornside）［5］，连翘环己醇（rengyol），异连翘环己醇（isorengyol），连翘环己醇氧化物（rengyoxide），连翘环己醇酮（rengyolone），连翘环己醇甙（rengyoside）A、B、C[5]；三萜类化合物：白桦脂酸（betulinic acid），齐墩果酸（oleanolic acid）［2］，熊果酸（ursolic acid）［3］，β-香树精乙酯（β-amyrin acetate），异降香萜烯酸乙酸酯（isobauerenyl acetate），20（S）-达玛-24-烯-3β，20-二醇-3-乙酸酯〔20（S）-dammar-24-ene-3β，20－diol－3－acetate］[7]等。

三、连翘药理作用
1.抗菌、抗病毒作用 1.1.抗细菌作用：将连翘种子挥发油乳剂以试管倍量稀释法进行抗菌试验，结果显示该药除对绿脓杆菌作用稍低外，对其它10株革兰氏阳性和阴性细菌均有较强的抗菌作用。其中对金黄色葡萄球菌的作用最强(抗菌效价为1／1.024)；其次为肺炎球菌；甲、乙型链球菌；卡他奈氏球菌；福氏痢疾杆菌；甲型副伤寒杆菌；(抗菌效价均为1／512)和大肠杆菌(抗菌效价为1/256)，对肺炎杆菌、普通变形杆菌抗菌效价均为1／28。选取对所试菌有抗菌作用之试验液，进行再传代培养试验，结果显示连翘种子挥发油对所试细菌的抗菌作用较为彻底而且稳定。连翘浓缩煎剂在体外有抗菌作用，可抑制伤寒杆菌、副伤寒杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、白喉杆菌及霍乱弧菌、葡萄球菌、链球菌等。连翘在体外的抑菌作用与金银花大体相似；为银翘散中抗菌之主要成分。金银花对沙门氏菌属，特别是伤寒杆菌以及溶血性链球菌的抑制作用似超过连翘，而对痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌之抑制则以连翘似较好。二者联合使用，在试管中并无协同作用，与黄连、黄芩组成的复方，体外抑菌作用比单用连翘时据云更强。连翘中抗菌的有效成分研究不多，连翘酚在试营中对金黄色葡萄球菌的抑菌浓度为1：5120；对痢疾杆菌为1：1280；对白喉杆菌及副伤寒(甲)杆菌为1：640，可能力抗菌有效成分。花对小鼠实验性结核病有一定疗效，对豚鼠则无效。此外，还报告过它在试管中及临床上的抗结核杆菌的作用。连翘的醇提取物在体外有抗钩端螺旋体作用，其强度不及黄连、荔枝草或金银花、黄芩，而与黄柏、蚤休相似。连翘水浸剂(1：5)在试管内对星形奴卡氏菌有些抑制作用。
1.2.抗真菌作用：将连翘种子挥发油乳剂以试管倍量稀释法进行抗白色和热带念珠菌的试验，结果显示该药对所试的二个菌株均有较明显的抗菌作用，其抗菌效价分别为1／1.024和1/512。
1.3.抗病毒作用 将连翘种子挥发油乳剂以鸡胚内法(药物浓度为1/32)和鸡胚外法进行抗亚洲甲型流感病毒和I型副流感病毒作用试验。可见连翘种子挥发油对京科68-1珠病毒在感染同时给药能显示作用，仙台株病毒在感染同时给药和感染前给药能显示作用。可以看出连翘种子挥发油乳剂在鸡胚外对京科68-1株和仙台株病毒均有显着的抗病毒作用。对所试两种病毒的抗病毒效价均为1／65，536。用斑点杂交法试验，连翘煎剂25%-100%浓度，有降低乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)含量的作用。
2.对心血管系统的影响 2.1.连翘注射液对中毒性休克时在体猫心的影响：实验用猫3只，腹腔麻醉，颈动脉插管测量血压，气管插管，连电动人工呼吸机，打开胸腔及心包，暴露心脏，用丝线将心尖联于微拉力传感仪，用三笔记录仪描记心脏舒缩曲线。实验前，先描记一段心肌舒缩波及血压曲线作为正常对照，然后静脉注射伤寒菌苗0.8-2.5ml／kg待出现较明显损害的心肌曲线(心肌舒缩波高低不齐，节律不整)，血压下降。静脉注射连翘注射液8g／kg后，心律变齐其中2只猫心肌舒缩波振幅增大，血压在30分钟后上升约40mmHg。提示有强心及升压作用。
2.2.对毛细血管通透性的影响 选健康小鼠雌雄不拘，体重18-22g，分为实验组和对照组，实验组7只动物，由尾静脉或皮下注射连翘注射液(60g/kg)，对照组9只动物，用生理盐水代替药物(0.4ml／只)。10分钟后经尾静脉注入0.5%伊文氏蓝液0.2ml／只。30分钟后，腹腔注射0.4%醋酸0.4ml／只。再30分钟后将小鼠脱血处死，打开腹腔用生理盐水冲洗腹腔渗出液，将洗出液置于5ml刻度试管至刻度，以2000转／分离心10分钟，取上清液测定其伊文氏蓝浓度。结果对照组腹腔渗出液伊文氏蓝浓度(μg%)为368.47±28.55(平均值±标准差，下同)，而实验组为160.12±28.37(P＜0.01)。表明连翘注射液对醋酸所致的毛细血管通透性有明显抑制作用。
3.对离体小肠的抑制作用 实验用豚鼠，按Magnur法作离体肠标本。离体小肠置于12×l0-2连翘营养液中，共做10次试验，结果4次表现为肠张力降低，6次先升后降。收缩振幅8次减弱，2次无变化。等容量生理盐水对离体肠无影响。提示连翘对豚鼠离体小肠有抑制作用。
4.抑制弹性蛋白酶活力作用：连翘等稀释成每1ml含1.5g、0.75g及0.375g，3种浓度。猪胰弹性蛋白酶(PPE)稀释成19u／0.5mg·ml及9.5u／0.25mg·ml两种浓度。将19u／0.5mg·ml的酶液与上述不同浓度的药物分别等量混匀后，各取10μl，分别滴入琼脂板孔内，每一皿内均留两孔各滴10μl、9.5u／0.25mg.ml的酶液作酶溶解平行对照，37℃温育24小时后测量溶解环直径。(酶活力与溶解环直径成线性关系)。连翘抑制弹性蛋白酶活力的作用见表5。可见三种浓度的连翘均可显着抑制0.095u的PPE的酶活力(P＜0.001)，其中在7.5mg浓度时完全抑制PPE酶活力。连翘水溶性粗提物10-3g/ml、10-4g/ml对磷酸二脂酶有抑制作用。
5.抗辐射损伤。连翘甲醇提取物1g/kg腹腔注射，于X线照射前5分钟给药，对小鼠皮肤损害有防护作用。