2017-09-08附子

附子
一、附子药典标准     本品为毛茛科植物乌头 Aconitum carmichaelii Debx.的子根的加工品。6月下旬至8月上旬采挖，除去母根、须根及泥沙，习称“泥附子”，加工成下列规格。
    （1）选择个大、均匀的泥附子，洗净，浸入胆巴的水溶液中过夜，再加食盐，继续浸泡，每日取出晒晾，并逐渐延长晒晾时间，直至附子表面出现大量结晶盐粒（盐霜）、体质变硬为止，习称“盐附子”。
    （2）取泥附子，按大小分别洗净，浸入胆巴的水溶液中数日，连同浸液煮至透心，捞出，水漂，纵切成厚约0.5cm的片，再用水浸漂，用调色液使附片染成浓茶色，取出，蒸至出现油面、光泽后，烘至半干，再晒干或继续烘干，习称“黑顺片”。
    （3）选择大小均匀的泥附子，洗净，浸入胆巴的水溶液中数日，连同浸液煮至透心，捞出，剥去外皮，纵切成厚约0.3cm的片，用水浸漂，取出，蒸透，晒干，习称“白附片”。
    【性状】  盐附子  呈圆锥形，长4～7cm，直径3～5cm。表面灰黑色，被盐霜，顶端有印陷的芽痕，周围有瘤状突起的支根或支根痕。体重，横切面灰褐色，可见充满盐霜的小空隙和多角形形成层环纹，环纹内侧导管束排列不整齐。气微，味咸而麻，刺舌。
    黑顺片  为纵切片，上宽下窄，长1.7～5cm，宽0.9～3cm，厚0.2～0.5cm。 外皮黑褐色，切面暗黄色，油润具光泽，半透明状，并有纵向导管束。质硬而脆，断面角质样。气微，味淡。
    白附片  无外皮，黄白色，半透明，厚约0.3cm。
    【鉴别】  取本品粉末2g，加氨试液3ml润湿，加乙醚 25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加二氯甲烷0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取苯甲酰新乌头原碱对照品、苯甲酰乌头原碱对照品、苯甲酰次乌头原碱对照品，加异丙醇-二氯甲烷（1：1）混合溶液制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液（单酯型生物碱）。再取新乌头碱对照品、次乌头碱对照品、乌头碱对照品，加异丙醇-二氯甲烷 （1：1）混合溶液制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液（双酯型生物碱）。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇（6.4：3.6：1）为展开剂，置氨蒸气饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，盐附子在与新乌头碱对照品、次乌头碱对照品和乌头碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；黑顺片或白附片在与苯甲酰新乌头原碱对照品、苯甲酰乌头原碱对照品、苯甲酰次乌头原碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点.
    【检查】  水分  不得过15.0%（通则0832第二法）。
    双酯型生物碱  照〔含量测定〕项下色谱条件、供试品溶液的制备方法试验。
    对照品溶液的制备  取新乌头碱对照品、次乌头碱对照品、乌头碱对照品适量，精密称定，加异丙醇-二氯甲烷（1：1） 混合溶液制成每1ml各含5μg的混合溶液，即得。
    测定法  分别精密吸取上述对照品溶液与〔含量测定〕项下供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品含双酯型生物碱以新乌头碱（C33H45NO11）、次乌头碱（C33H45NO10）和乌头碱（C34H47NO11）的总量计，不得过0.020%。
    【含量测定】  照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四氢呋喃（25：15）为流动相A，以0.1mol/L醋酸铵溶液（每1000ml加冰醋酸0.5ml）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，检测波长为235nm。理论板数按苯甲酰新乌头原碱峰计算应不低于3000。
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     时间（分钟） 流动相A（%） 流动相B（%）
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     0～48        15→26     85→74
    48～49        26→35     74→65 
    49～58        35         65   
    58～65        35→15     65→85
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    对照品溶液的制备  取苯甲酰新乌头原碱对照品、苯甲酰乌头原碱对照品、苯甲酰次乌头原碱对照品适量，精密称定，加异丙醇-二氯甲烷（1：1）混合溶液制成每1ml各含10μg的混合溶液，即得。
    供试品溶液的制备  取本品粉末（过三号筛）约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氨试液3ml，精密加入异丙醇-乙酸乙酯（1：1）混合溶液50ml，称定重量，超声处理（功率300W，频率40kHz，水温在25℃以下）30分钟，放冷，再称定重量，用 异丙醇-乙酸乙酯（1：1）混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25ml，40℃以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入异丙醇-二氯甲烷（1：1）混合溶液3ml溶解，滤过，取续滤液，即得。
    测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含苯甲酰新乌头原碱（C31H43NO10）、苯甲酰乌头原碱（C32H45NO10）和苯甲酰次乌头原碱 （C31H43NO9）的总量，不得少于0.010%。
    饮片
    【炮制】  附片（黑顺片、白附片）  直接入药。
    【性状】【鉴别】【检查】【含量测定】  同药材。
    淡附片  取盐附子，用清水浸漂，每日换水2～3次，至盐分漂尽，与甘草、黑豆加水共煮透心，至切开后口尝无麻苦感时，取出，除去甘草，黑豆，切薄片，晒干。 
    每100kg盐附子，用甘草5kg、黑豆10kg。
    本品呈纵切片，上宽下窄，长1.7～5cm，宽0.9～3cm，厚 0.2～0.5cm。外皮褐色。切面褐色，半透明，有纵向导管朿。 质硬，断面角质样。气微，味淡，口尝无麻舌感。
    【检查】  双酯型生物碱  同药材，含双酯型生物碱以新乌头碱（C33H45NO11）、次乌头碱（C33H45NO10）和乌头碱（C34H47NO11）的总量计，，不得过0.010%。
    【鉴别】【检查】（水分）【含量测定】  同药材。
    炮附片  取附片，照烫法（通则0213）用砂烫至鼓起并微变色。
    本品形如黑顺片或白附片，表面鼓起黄棕色，质松脆。气微，味淡。
    【鉴别】【检查】  同附片。
    【性味与归经】辛、甘，大热；有毒。归心、肾、脾经。
    【功能与主治】  回阳救逆，补火助阳，散寒止痛。用于亡阳虚脱，肢冷脉微，心阳不足，胸痹心痛，虚寒吐泻，脘腹冷痛，肾阳虚衰，阳痿宫冷，阴寒水肿，阳虚外感，寒湿痹痛。
    【用法与用量】  3～15g，先煎，久煎。
    【注意】  孕妇慎用；不宜与半夏、瓜蒌、瓜蒌子、瓜蒌皮、天花粉、川贝母、浙贝母、平贝母、伊贝母、湖北贝母、白蔹、白及同用。
    【贮藏】  盐附子密闭，置阴凉干燥处；黑顺片及白附片置干燥处，防潮。
    注：盐附子仅做〔性状〕检测。


二、附子化学成分
附子含乌头碱（aconitine），中乌头碱（mesaconitine），次乌头碱（hypaconitine），它拉乌头胺（talatisamine），和乌胺（higeramine）即是消旋去甲基衡州乌药碱（demethylcoclaurine），棍掌碱氯化物（coryneine chloride），异飞燕草碱（isodelphinine），苯甲酰中乌头碱（benzoyl mesaconitine），新乌宁碱（neoline），附子灵（fuziline），北乌头碱（beiwutine），多根乌头碱（karakoline），去氧乌头碱（deoxyaconitine），附子亭碱（fuzitine），准葛尔乌头碱（songorine）尿嘧啶（uracil），江油乌头碱（jiangyouaconitine），新江油乌头碱（neojiangyouaconitine），去甲猪毛菜碱（salsolinol）等。

三、附子药理作用
1.抗炎作用和对内分泌的影响：大鼠口服附子20%煎剂2.5ml／100g或50%煎剂2ml／100g对甲醛或蛋清引起的大鼠踝关节肿均有非常显着的抑制作用（P＜0.01）。熟附片煎剂0.5g／kg亦能非常显着的抑制大鼠蛋清性足肿。生附子的甲醇提取物能抑制蛋清引起的小鼠腹腔血管渗透性增加和角叉菜胶引起的踝关节肿。大鼠口服300mg／kg对踝关节的佐剂性关节炎的作用比口服50mg／kg保太松强，口服30mg／kg时，对棉球肉芽肿的抑制作用比口服20mg／kg可的松强。附子水煎醇沉液（每1ml=生药2g）腹腔注射不同剂量给于大鼠，对蛋清性关节肿胀具有不同的抑制作用，其强度与药物剂量呈正相关性。对附子抗炎作用的机制看法不一：如有报道给附子后，肾上腺内维生素C和胆甾醇含量减少，尿排泄17-酮同类固醇增加，血中嗜酸性白血球减少，碱性磷酸酯酶和肝糖无增加，似有兴奋垂体-肾上腺皮质系统的作用。亦有报道，在切除肾上腺后，附子的抗炎作用仍保存，认为其抗炎作用与垂体-肾上腺皮质系统无关。有人认为附子本身具有糖皮质激素样作用。
2.镇痛、镇静和对体温的影响：附子0.1-1g／kg给于动物，能抑制压迫大鼠尾部引起的疼痛和腹腔注射醋酸引起的小鼠扭体反应。附子水煎醇沉液（1ml＝2g生药）腹腔注射给于小鼠，可提高小鼠的痛阈值。小鼠口服生附子冷浸液能延长环己巴比妥钠的睡眠时间，减少自主运动，并能降低体温达2小时之久，而炮制附子在相同剂量下则无上述作用。但在寒冷情况下，附子冷浸液和水煎剂均能抑制寒冷引起的鸡和大鼠的体温下降，甚至使降低的体温恢复，延长生存时间，降低死亡率。附子水煎剂20g／kg灌胃给于小鼠，可非常显着延长受寒小鼠的存活率（P＜0.01）。附子水煎剂能显着对抗小鼠水浸应激和大鼠盐酸损伤性溃疡；还能显着对抗蓖麻油和番泻叶引起的小鼠药物性腹泻，在热板法等中的镇痛作用等，被认为是附子温中止痛的药理学基础。
3.对心血管系统的作用：。
3.1.强心和升压作用：去甲乌药碱是附子中的强心成分之一，含量甚微。它对心血管系统的作用很强，能明显增加离体蛙心，在位兔心和豚鼠衰竭心脏的心肌收缩力，给麻醉犬静脉注射l-2μg/kg后，左心室压力上升最大速率和心输出量均增加，冠脉、脑和外周动脉以及全身血管阻力降低，心肌氧耗量增加，大鼠培养心肌细胞搏动频率和幅度也增加。上述作用可被心得安阻断，这些都与异丙肾上腺素的作用相似。附子中的去甲猪毛菜碱是一种弱β-兴奋剂，它能兴奋豚鼠离体心房，增加收缩的频率，静脉注射能升高正常和毁脊髓大鼠血压，加快心率，而毁脊髓大鼠对去甲猪毛菜碱的升压作用比正常大鼠更敏感，因而认为去甲猪毛菜碱既有对β-受体及α-受体均有兴奋作用。附子中棍掌碱具有明显的升压和强心作用，静脉注射40μg/kg可使大鼠血压升高50%，3×10(-6)g／ml可使离体豚鼠右心房的收缩幅度和频率分别增加250和120%。对毁脊髓猫也有上述作用。它的升压作用可破α-肾上腺素能受体阻滞剂-酚妥拉明取消，其升压作用及对豚鼠右心房的作用也能被神经节阻断药-六烃季胺所对抗。表明其作用与兴奋神经节或节前纤维有关。
3.2.对心率和心律失常的影响：去甲乌药碱能加速心率，对实验性缓慢型心律失常有改善作用。临床观察也证实了去甲乌药碱对缓慢型心律失常有明显的治疗作用。静脉注射后，病人的心率均有不同程度的增加，窦性心动过缓恢复到正常水平，窦房阻滞和结区房室传导功能得到改善，从而使传导阻滞减轻或消失，其机理主要为缩短A-H间期。实验还表明，去甲乌药碱和异丙肾上腺素对β-肾上腺素能受体的亲和力相似，但内在活性明显小于异丙肾上腺素。从而直接证明去甲乌药碱是β-肾上腺素能受体部分激动剂。对气管β2-受体也有明显的激动作用，此作用比直接激动心肌B1-受体强。为解释附子的回阳救逆提供了部分证据。
附子的水溶部分（不含乌头碱类生物碱的水溶部分）60、120mg／kg（相当于小鼠静脉注射LD50的1／10-1／5）或生理盐水（对照）静脉注射给于大鼠，给药5分钟后静脉注射乌头碱30μg/kg，记录出现心律失常时间均比对照组明显延迟（P＜0.001）。给120mg／kg组的6只大鼠20分钟内均未出现心率失常（P＜0.001）。大鼠口服附子水溶部分550、1100mg／kg，对抗乌头碱所致的心律失常作用，亦得到上述类似的结果。附子的水溶部分对静脉注射乌头碱40μg/kg和20μg/kg的大鼠，出现心律失常5分钟后，分别静脉注射200mg、400mg／kg和十二指肠给于500mg、1000mg／kg，均可十分显着地转为正常心律（P＜0.001）。但附子水溶部分对哇巴因、或氯仿所致的心律失常无效。有意义的是在同一生药中同时存在引起和对抗心律失常的化学成分。
3.3.对休克的影响：附子水溶部分2mg／（kg.min）或1次30mg／kg静脉滴注给于由内毒素引起休克的猫。结果可明显对抗主动脉压力（BP）、左心室收缩压力（LVP）和左心室压力上升最大速率（LVdp／dt，max）的降低和心率和减慢并延长生存时间。表明对内毒素引起的休克有治疗作用。川附子提取物801，可显着延长烫伤休克大鼠的存活时间。
3.4.对血流量的影响：附子有扩张外周血管的作用，附子煎剂可明显扩张麻醉犬和猫的后肢血管，乌头煎剂也有此作用。静脉注射附子水溶部分7.5，15和30mg／kg，可使麻醉犬股动脉血流量分别增加30，70和129%，阻力降低0.42和50%，作用可维持10分钟左右，此作用可解释用附子后四肢变暖的原因。
3.5.对心肌缺血的影响：附子注射液和水溶部分对急性心肌缺血有明显的保护作用。明显延长小鼠耐缺氧时间，降低碱性磷酸酶活性。对抗垂体后叶素引起的大鼠急性心肌缺血；显着减少结扎前降支引起的麻醉犬心外膜电图ST段的提高以及ST段升高的总数。
3.6.其它作用：附子水提物能明显延长白陶土部分凝血酶原时间及凝血酶原消耗时间。附子强心注射液（每1ml含去甲乌药碱3mg）4ml，加入5%葡萄糖注射液400ml中，分别于犬急、慢性病窦模型中维持静脉点滴，同时进行心房内调搏测定窦房结恢复时间（SNRTc）及心外膜起搏点标测。结果发现附子注射后降心率加快，SNRTc缩短外，心脏的起搏点也发生移动，绝大多数的次级起搏点上移至窦房结区，为临床治疗病窦提供了依据。附子水提物有促进血小板聚集等作用。乌头多糖有降低血糖作用。
4.对免疫功能的影响：观察附子注射液对小鼠血清溶菌酶活性、血液抗体及脾脏抗体细胞和对豚鼠血清补体含量的影响，发现可提高小鼠体液免疫功能及豚鼠血清补体含量，但对小鼠血清溶菌酶活性无明显影响；以RE花环及细胞转化实验研究对机体细胞免疫影响时发现，附子注射液可使T细胞和RE花环形成细胞明显上升，0.4ml／（kg.d）共9天（皮下注射），可使兔淋巴细胞转化率显着上升，与对照比较P＜0.01。
5.对阳虚动物模型的作用机制：用高效液相色谱-电化学检测联用，以樟脑磺酸为离子对试剂，测定可的松阳虚大鼠及正常大鼠下丘脑单胺类神经递质。观察助阳药附子的效果。结果表明：可的松阳虚大鼠下丘脑去甲肾上腺素（NA）较正常大鼠下降，肾上腺素（A）升高（P均＜0.05)。用附子后能恢复正常。且可使可的松阳虚大鼠及正常大鼠多巴胺（DA）均升高（P分别＜0.05及P＜0.01)，3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）下降（P＜0.001)，并使正常大鼠5-羟色胺（5-HT）升高（P＜0.001)，用药后阳虚及正常大鼠都表现为DA／DOPAC及5-HT／5-羟吲哚醋酸（5-HTAA）比值升高（P＜0.01-0.001)，提示附子似有抑制下丘脑单胺氧化酶活性。