2019-01-04铁皮石斛
一、铁皮石斛药典标准
铁皮石斛
Tiepishihu
DENDROBII OFFICINALIS CAULIS
本品为兰科植物铁皮石斛 Dendrobium officinale Kimura et Migo的干燥茎。11月至翌年3月采收,除去杂质,剪去部分须根,边加热边扭成螺旋形或弹簧状,烘干;或切成段,干燥或低温烘干,前者习称“铁皮枫斗”(耳环石斛);后者习称“铁皮石斛”。
【性状】 铁皮枫斗 本品呈螺旋形或弹簧状,通常为2~6个旋纹,茎拉直后长3.5~8cm,直径0.2~0.4cm。表面黄绿色或略带金黄色,有细纵皱纹,节明显,节上有时可见残留的灰白色叶鞘;一端可见茎基部留下的短须根。质坚实,易折断,断面平坦,灰白色至灰绿色,略角质状。气微,味淡,嚼之有黏性。
铁皮石斛 本品呈圆柱形的段,长短不等。
【鉴别】 (1)本品横切面:表皮细胞1列,扁平,外壁及侧壁稍增厚、微木化,外被黄色角质层,有的外层可见无色的薄壁细胞组成的叶鞘层。基本薄壁组织细胞多角形,大小相似,其间散在多数维管束,略排成4~5圈,维管率外韧型,外围排列有厚壁的纤维束,有的外侧小型薄壁细胞中含有硅度块。含草酸钙针晶束的黏液细胞多见于近表皮处。
(2)取本品粉末1g,加三氯甲烷-甲醇(9:1)混合溶液15ml,超声处理20分钟,滤过,滤液作为供试品溶液。另取铁皮石斛对照药材1g,同法制成对照药材溶液,照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各2~5μl,分别点于同硅胶G薄层板上,以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(6:3:1)为展开剂,展开,取出,烘干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在95℃加热约3分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】 甘露糖与葡萄糖峰面积比 取葡萄糖对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含50μg的溶液,作为对照品溶液。精密吸取0.4ml,按〔含量测定〕甘露糖项下方法依法测定。供试品色谱中,甘露糖与葡萄糖的峰面积比应为2.4~8.0。
水分 不得过12.0%(通则0832第二法)。
总灰分 不得过6.0%(通则2302)。
【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法(通则2201)项下的热浸法测定,用乙醇作溶剂,不得少于6.5%。
【含量测定】 多糖 对照品溶液的制备取无水葡萄糖对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含90μg的溶液,即得。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,分别置10ml具塞试管中,各加水补至1.0ml,精密加入5%苯酚溶液1ml(临用配制),摇匀,再精密加硫酸5ml,摇匀,置沸水浴中加热20分钟,取出,置冰浴中
冷却5分钟,以相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在488nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.3g,精密称定,加水200ml,加热回流2小时,放冷,转移至250ml量瓶中,用少量水分次洗涤容器,洗液并人同一量瓶中,加水至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置15ml离心管中,精密加入无水乙醇10ml,摇匀,冷藏1小时,取出,离心(转速为每分钟4000转)20分钟,弃去上清液(必要时滤
过),沉淀加80%乙醇洗涤2次,每次8ml,离心,弃去上清液,沉淀加热水溶解,转移至25ml量瓶中,放冷,加水至刻度,摇匀,即得。
测定法 精密量取供试品溶液1ml,置10ml具塞试管中,照标准曲线制备项下的方法,自“精密加入5%苯酚溶液1ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的量,计算,即得。
本品按干燥品计算,含铁皮石斛多糖以无水葡萄糖(C6H12O6)计,不得少于25.0%。
甘露糖 照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.02mol/L的乙酸铵溶液(20:80)为流动相;检测波长为250nm。理论板数按甘露糖峰计算应不低于4000。
校正因子测定 取盐酸氨基葡萄糖适量,精密称定,加水制成每1ml含12mg的溶液,作为内标溶液。另取甘露糖对照品约10mg,精密称定,置100ml量瓶中,精密加入内标溶液1ml,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,吸取400μl,加0.5mol/L的PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)甲醇溶液与0.3mol/L的氢氧化钠溶液各400μl,混匀,70℃水浴反应100分钟。再加0.3mol/L的盐酸溶液500μl,混匀,用三氯甲烷洗涤3次,每次2ml,弃去三氯甲烷液,水层离心后,取上清液10μl,注入液相色谱仪,测定,计算校正因子。
测定法 取本品粉末(过三号筛)约0.12g,精密称定,置索氏提取器中,加80%乙醇适量,加热回流提取4小时,弃去乙醇液,药淹挥干乙醇,滤纸筒拆开置于烧杯中,加水100ml,再精密加入内标溶液2ml,煎煮小时并时时搅拌,放冷,加水补至约100ml,混匀,离心,吸取上清液1ml,置安瓿瓶或顶空瓶中,加3.0mol/L的盐酸溶液0.5ml,封口,混匀,110℃水解1小时,放冷,用3.0mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至中性,吸取400μl,照校正因子测定方法,自“加0.5mol/L的PMP甲醇溶液”起,依法操作,取上清液注入液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含甘露糖(C6H12O6)应为13.0%~38.0%。
【性味与归经】 甘,微寒。归胃、肾经。
【功能与主治】 益胃生津,滋阴清热。用于热病津伤,口干烦渴,胃阴不足,食少干呕,病后虚热不退,阴虚火旺,骨蒸劳热,目暗不明,筋骨痿软。
【用法与用量】 6~12g。
【贮藏】 置通风干燥处,防潮。
二、铁皮石斛化学成分
利用多种色谱方法,从铁皮石斛药材分离出单体化合物72个,通过现代波谱技术鉴定了63个,发现新化合物18个,所得化合物的结构类型如下,苯类及其衍生物共27个:铁皮石斛素A,铁皮石斛素B,铁皮石斛素C,铁皮石斛素D,铁皮石斛素E,铁皮石斛素F,铁皮石斛素G,铁皮石斛素H,铁皮石斛素I,铁皮石斛素J,铁皮石斛素K,铁皮石斛素L,铁皮石斛素M,铁皮石斛素N,铁皮石斛素O,铁皮石斛素P,铁皮石斛素Q,4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄,3,4-二羟基-5,4′-二甲氧基联苄,3′-羟基-3,4,5′-三甲氧基联苄,4,4′-二羟基-3,3′,5-三甲氧基联苄,3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄,3′,4-二羟基-3,5′-二甲氧基联苄,二氢白藜芦醇,dendromoniliside E,denbinobin,2,4,,7-三羟基-9,10-二氢菲。
酚类化合物12个:N-p-香豆酰酪胺,反-N-(4-羟基苯乙基)阿魏酸酰胺,二氢松柏醇二氢对羟基桂皮酸酯,二氢阿魏酸酪胺,对羟基苯丙酰酪胺,
丁香酸,
丁香醛,
香草酸,
对羟基苯丙酸,对羟基桂皮酸,
阿魏酸,
对羟基苯甲酸。
木脂素类化合物4个:(+)-丁香脂素-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,icariolA_2-4-O-β-D-glucopyranoside,(+)-lyoniresinol-3a-O-β-D-glucopyranoside,及裂异落叶松脂醇。
内酯类化合物2个:钩状石斛素和洋地黄内酯。
二氢黄酮类化合物2个:
柚皮素和3′,5,5′,7-四羟基二氢黄酮。
其他类型化合物16个:铁皮石斛素R,erigesideⅡ,腺苷,尿苷,蔗糖,5-羟甲基糠醛,koaburaside,反式阿魏酸二十八烷基酯,对羟基反式肉桂酸三十烷基酯,对羟基顺式肉桂酸三十烷基酯,
胡萝卜苷,
β-谷甾醇,十六烷酸,十七烷,三十一烷醇,及十七烷酸。
18个新化合物为:铁皮石斛素A,铁皮石斛素B,铁皮石斛素C,铁皮石斛素D,铁皮石斛素E,铁皮石斛素F,铁皮石斛素G,铁皮石斛素H,铁皮石斛素I,铁皮石斛素J,铁皮石斛素K,铁皮石斛素L,铁皮石斛素M,铁皮石斛素N,铁皮石斛素O,铁皮石斛素P,铁皮石斛素Q,及铁皮石斛素R。
三、铁皮石斛药理作用
1.胃阴虚及热病伤津证:石斛长于滋养胃阴,生津止渴,兼能清胃热。主治热病伤津,烦渴、舌干苔黑之证,常与天花粉、鲜生地、麦冬等品同用。治胃热阴虚之胃脘疼痛、牙龈肿痛、口舌生疮可与生地、麦冬、黄芩等品同用。
2.肾阴虚证:石斛能滋肾阴,兼能降虚火,适用于肾阴亏虚之目暗不明、筋骨痿软及阴虚火旺,骨蒸劳热等证。肾阴亏虚,目暗不明者,常与枸杞子、熟地黄、菟丝子等品同用。肾虚火旺,骨蒸劳热者,宜与生地黄、枸杞子、黄柏、胡黄连等滋肾阴、退虚热之品同用。
3.免疫调节:石斛多糖能促进机体体液免疫、细胞免疫和诱生多种细胞子,具有免疫增强效果。铁皮石斛多糖能够显著提升白细胞数和促进淋巴细胞产生移动抑制因子,强有力地消除实验条件下免疫抑制剂环磷酰胺的加入所引发的副作用。铁皮石斛多糖对T淋巴细胞转化功能、NK活性、巨噬细胞吞噬功能及溶血素值均有明显提高作用。