2017-11-06四季青

四季青
一、四季青药典标准     本品为冬青科植物冬青Ilex chinensis Sims的干燥叶。秋、冬二季采收，晒干。
    【性状】本品呈椭圆形或狭长椭圆形，长6～12cm，宽2～4cm。先端急尖或渐尖，基部楔形，边缘具疏浅锯齿。上表面棕褐色或灰绿色，有光泽；下表面色较浅；叶柄长0.5～1.8cm。革质。气微清香，味苦、涩。
    【鉴别】（1）本品粉末棕褐色至灰绿色。上表皮细胞多角形，垂周壁平直或微弯曲，壁稍厚。下表皮细胞不规则形或类长方形，细胞较小。气孔不定式。叶肉细胞含草酸钙簇晶及少数方晶，簇晶直径18～55μm。纤维单个敢在或成束，多细长，直径9～20μm。
    （2）取本品粉末1g，加乙酸乙酯20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取原儿茶酸对照品、长梗冬青苷对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（7：1：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以1%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
    【检查】水分  不得过12.0%（通则0832第二法）。
    总灰分  不得过7.0%（通则2302）。
    酸不溶性灰分  不得过3.0%（通则2302），
    【含量测定】照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇（含10%的异丙醇）为流动相A，以水（含10%的异丙醇）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；蒸发光散射检测器检测。理论板数按长梗冬青苷峰计箅应不低于2000。
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    时间（分钟） 流动相A（%）     流动相B（%）
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    0～10                 30→35           70→65
    10～12                35→43           65→57
    12～30                43               57
    30～40                43→57           57→43
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    对照品溶液的制备  取长梗冬青苷对照品适量，精密称定，加80%甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，即得。
    供试品溶液的制备  取本品粉末（过四号筛）约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率300W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    测定法  分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。
    本品按干燥品计算，含长梗冬青苷（C36H58O10）不得少于1.35%。
    【性味与归经】苦、涩，凉。归肺、大肠、膀胱经。
    【功能与主治】清热解毒，消肿祛瘀。用于肺热咳嗽，咽喉肿痛，痢疾，胁痛，热淋；外治烧烫伤，皮肤溃疡。
    【用法与用量】15～60g。外用适量，水煎外涂。
    【贮藏】置干燥处。


二、四季青化学成分
四季青叶中主要成分为冬青三萜甙(ilexoside)A，亦即3β-O-(β-D-吡喃木糖基)泰国树脂酸［3β-O-(β-D-xylopyranosyl)siaresinolic acid］和冬青三萜甙B甲酯(ilexosideB methylester)亦即3β-O-(β-D-吡喃木糖基)坡模醇酸甲酯［3β-O-(β-D-xylopyranosyl)pomolic acid methyl ester］。 此外，还含原儿茶酸(protocatechuic acid)，原儿茶醛(pro-tocatechuic aldehyde)，熊果酸(ursolic acid)，鞣质(tannin)，黄酮甙(flavone glycoside)和糖类(sugar)等。

三、四季青药理作用
1.抗菌作用：四季青相当于生药0.0125g/ml的稀释水溶液对绿脓杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、福氏痢疾杆菌、产碱杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑制作用。当水溶液稀释至相当于生药0.0031g/ml时，对金葡球菌仍有抑制作用。其抗菌成分主要为原儿茶酸，对大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌和金葡球菌4个菌种全部抑制的最低浓度为1.5mg／ml，可能还含其他抗菌有效成分。四季青制剂，无论口服或肌内注射，在用药后的第1-2日，家兔浓缩尿中所含四季青成分均达有效抗菌浓度，表明此药稳定，吸收完全，经过体内代谢后，在尿中仍能发挥治疗作用。
2.治疗实验性烫伤作用：四季青药水（含鞣质量1.6％）给予大鼠Ⅱ度实验性烫伤创面涂布后，即与创面的渗液结成较牢固的保护性痂膜。3天后给药组大鼠肢体肿胀完全或大部分消退，消肿速度明显比对照组为快。
3.对心血管系统的影响：四季青所含成分原儿茶醛22mg/kg，静脉注射对猫扩张冠脉作用较强；原儿茶酸50mg/kg静脉注射，对猫主要表现在心肌耗氧量降低；而总黄酮甙10mg/kg、5mg/kg、2.5mg/kg与鞣质20mg/kg，分别静脉注射对心血管系统影响不大。
4.抗炎作用：四季青所含原儿茶酸对小鼠甲醛性足肿有明显的抑制作用，效果强于水杨酸而接近乙酰水杨酸。对大鼠甲醛性足肿也有暂时抑制效果，尿中17-羟类固醇排出量可暂时增加，且对切除肾上腺的大鼠也同样有效，说明其抗炎作用与肾上腺类固醇激素关系不大。
5.抗肿瘤作用：四季青及原儿茶酸对小鼠实验性HF肉瘤及肉瘤（S180）有轻度抑制作用。
6.体内过程：四季青煎剂口服后易从胃肠道吸收，作用快而完全。原儿茶酸注射液静注后迅速分布于体内各脏器官组织中，并能透过血脑屏障，含量以肾脏为最高，脑、肝、心等次之，但2小时后含量已甚低微，大鼠口服、腹腔注射，家兔口服原儿茶酸后，可以原形。脱羧形成儿茶酚、甲基化形成香草酸（vanillicacid）从尿排出。四季青煎剂1次大量口服，兔浓缩尿中药物抑菌作用可保持2天,证明排泄较慢，其成分静注后，绝大部分均在给药后4小时内排出。
7.毒性：四季青煎剂小鼠灌服的半数致死量为233.2±11.56g（生药）／kg，相当于成人l天量［1.2g（生药）／kg］的194倍，表明该药的急性毒性较小，四季青煎剂每日10g（生药）／kg，给家兔灌服14天后，对家兔肝功能有一定损害，即停药2星期后ALT比给药前增高，病检见肝组织有损害，但较轻微，对肾功能无明显影响。四季青［2g（生药）／ml］与四季青紊［100mg（原儿茶酸）／ml］均制成注射液，给家兔分别静脉注射，在连续给药1星期后与停药1星期后，分别检查各项生理生化指标，均无统计学上的显着差异。病检对照组与给药组无明显差别。