2017-10-09大青叶

大青叶
一、大青叶药典标准     本品为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥叶。夏、秋二季分2～3次采收，除去杂质，晒干。
    【性状】本品多皱缩卷曲，有的破碎。完整叶片展平后呈长椭圆形至长圆状倒披针形，长5～20cm，宽2～6cm；上表面暗灰绿色，有的可见色较深稍突起的小点；先端钝，全缘或微波状，基部狭窄下延至叶柄呈翼状；叶柄长4～10cm，淡棕黄色。质脆。气微，味微酸、苦、涩。
   【鉴别】（1）本品粉末绿褐色。下表皮细胞垂周壁稍弯曲，略成连珠状增厚；气孔不等式，副卫细胞3～4个。叶肉组织分化不明显；叶肉细胞中含蓝色细小颗粒状物，亦含橙皮苷样结晶。
    （2）取本品粉末0.5g，加三氯甲烷20ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取靛蓝对照品、靛玉红对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-丙酮（5：4：2）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同的蓝色斑点和浅紫红色斑点。
    【检查】水分 不得过13.0%（通则 0832第二法）。
    【浸出物】照醇溶性浸出物测定法（通则 2201）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于16.0%。
    【含量测定】照高效液相色谱法（通则 0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（75：25）为流动相；检测波长为289nm。理论板数按靛玉红峰计算应不低于4000。
    对照品溶液的制备 取靛玉红对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含2μg的溶液，即得。
    供试品溶液的制备 取本品细粉0.25g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷，浸泡15小时，加热回流提取至提取液无色。回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解并转移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含靛玉红（C16Hl0N2O2）不得少于0.020%
    饮片
    【炮制】除去杂质，抢水洗，切碎，干燥。
    本品为不规则的碎段。叶片暗灰绿色，叶上表面有的可见色较深稍突起的小点；叶柄碎片淡棕黄色。质脆。气微，味微酸、苦、涩。
    【检查】水分 同药材，不得过10.0%。
    【鉴别】【浸出物】【含量测定】同药材。
    【性味与归经】苦，寒。归心、胃经。
    【功能与主治】清热解毒，凉血消斑。用于温病高热，神昏，发斑发疹，痄腮，喉痹，丹毒，痈肿。
    【用法与用置】9～15g。
    【贮藏】置通风干燥处，防霉。


二、大青叶化学成分
叶含靛蓝（indigo，indigotin），菘蓝甙（isatan）B，靛玉红（indirubin）。还含铁、钛、锰、锌、铜以及钻、镍、硒、铬、砷等无机元素。菘蓝甙水解可变为靛蓝和呋喃木糖甜酸（D-xylo-5-hexulofuranosonic acid）。

三、大青叶药理作用
1.抗菌作用：路边青叶煎剂在试管内对多种痢疾杆菌均有杀菌作用；不论对合霉素、呋喃西林、磺胺噻唑、小檗碱敏感或耐药之痢疾杆菌，对路边青叶均很敏感。对脑膜炎球菌亦有杀灭作用。对钩端螺旋体波蒙那群、黄疸出血群沃尔登型、七日热型也有杀灭作用。本品所含的色胺酮，对引起脚癣的皮癣菌有很强的抗菌作用。其MIC（ug/ml），须发癣菌为3.1，红色发癣菌3.1，断发癣菌3.1，大小孢霉3.1，石膏状小孢霉6.3，乳状表皮癣菌3.1，枯草杆菌25，多粘芽胞杆菌50。对杆菌和皮真菌特别有效。
2．抗癌作用：2.1对治疗慢性粒细胞白血病的作用 靛玉红对L7212白血病小鼠的抑制率较高，从动物实验观察靛玉红与其他抗癌药进行比较。
2.1.1靛玉红对正常豚鼠细胞免疫功能的影响 对正常豚鼠（体重300-400g）每日ig靛玉红悬液（以吐温作表面活性剂），100-200mg/kg，给药43-60d，以吐温及环磷酰胺作对照，观察末梢血中淋巴细胞数、OT皮肤迟发型超敏试验、PHA淋巴细胞转化试验及巨噬细胞吞噬功能试验，结果除巨噬细胞吞噬功能三组相似外，其他各项靛玉红组与吐温组均无明显差别，而环磷酰胺组显着低于前二组。病理观察，靛玉红组与吐温组均无明显改变，而环磷酰胺组增生明显减低，呈急性骨髓衰竭。
2.1.2体液免疫方面抗体生成试验观察 对每只豚鼠im25%绵羊红细胞，隔日1ml，第四次注射后7d取心血，测定抗绵羊红细胞抗体的凝集及溶血效价。结果：免疫前豚鼠血清与绵羊红细胞凝集反应和溶血反应均为阴性，免疫后靛玉红与吐温组上述效价显着地高于环磷酰胺组，靛玉红组略高于吐温组。
2.1.3对正常造血细胞生成动力学作用 以正常小鼠、大鼠、豚鼠为实验对象，研究了长期大量应用靛玉红对造血集落形成细胞、骨髓细胞增殖能力、骨髓容量以及末梢血象的作用，并以马利兰及阿糖胞甙作比较。结果：无论内源法与外源法，大剂量靛玉红（相当于临床成人剂量50倍）并无明显抑制小鼠造血集落形成细胞（CFUs）的作用，而马利兰组CFUs及脾重均显着减轻。骨髓细胞3H-脱氧胸腺嘧啶核甙（3H一TdR）掺入实验：结果大剂量靛玉红给药14d，其股骨有核细胞容积、10?骨髓细胞及股骨细胞cpm均与对照接近，而马利兰及阿糖胞甙组骨髓有核细胞计数及股骨cpm均明显减低，见表5。大鼠及豚鼠长期投与靛玉红，其骨髓组织学容量及骨髓有核细胞3H一TdR掺入与对照组均无差异。
2.1.4对小鼠、大鼠及豚鼠末梢血象的影响 大剂量靛玉红给药14d及30d，白细胞、红细胞比积及网织红细胞与对照组比较均无明显改变，而马利兰给药30d组三项指标均明显受抑制。
从临床观察发现靛玉红对慢性粒细胞白血病患者的细胞兔疫功能有明显的提高，对染色体ph1阳性率和畸变率，SCE率等计数结果与治疗前比较差异非常显着或显着。从临床疗效观察，效果亦较好。其特点为靛玉红对体液免疫功能无抑制作用，对实验动物正常造血动力学无明显影响。超微结构下骨髓细胞呈核溶现象，不同于三尖杉酯碱等药物呈凋落现象。
2.2合成靛玉红的抗肿瘤作用 合成品的靛玉红为紫红色粉状结晶，mp348-353℃，纯度在97%以上，按常规的肿瘤接种方法及疗效评定标准观察了合成靛玉红对几种动物移植性肿瘤的疗效。一般于接种后24h，将该药用植物油及阿拉伯胶配成乳剂，按每天50或200mg/kg剂量，连续给动物ig或ip8-10d，结果对小鼠白血病L7212及P388，未见有明显的治疗作用。但对小鼠Lewis肺癌及大鼠walker癌256，无论po或ip，均有明显的抑制作用。
由于靛玉红的水溶性及脂溶性均较差，影响吸收，为此采用了不同剂型和剂量观察对动物肿瘤的疗效。
2.3半合成的靛玉红抗肿瘤作用 按国内常用的体内筛选方法，观察了半合成品靛玉红对大鼠瓦克癌肉瘤256，小鼠肉瘤180和615小鼠淋巴白血病L7212的疗效。
2.4 靛玉红衍生物的抗肿瘤活性 由于靛玉红存在剂型单一，不能多种途径给药，且有部分患者用药后发生消化道反应，甚至便血等。因此进行了靛玉红衍生物的合成研究，通过合成15个衍生物对动物肿瘤的疗效和毒性观察，认为N，N'-二甲基靛玉红、N-甲基靛玉红甲肟、N-甲基靛玉红肟甲醚、N一乙酰基靛玉工红四个衍生物对大鼠W256的抗肿瘤活性与靛玉红相似，毒性也不大。其中N，N'-二甲基靛玉红和N一甲基靛玉红肟的抗肿瘤活性比靛玉红强，不但对大鼠W256有效，还对靛玉红不敏惑的L7212有效。
本品所含的靛玉红对小鼠肉瘤180也有一定的抑制作用。对大鼠瓦克癌瘤256，ip和200mg/kg，共6-7日，抑制率分别为23-33%。Sc200mg/kg2次，可延长瓦克癌256腹水型大鼠生存时间43%。对小鼠Lewis肺癌亦有明显的抑制作用。临床用于治疗慢性粒细胞性白血病，疗效与马利兰相当，且无明显骨髓抑制作用。
3.解热作用:蓼蓝叶煎剂5-10g/kgig，可使霍乱、伤寒混合疫苗引起发热的家兔体温明显下降。大青叶煎剂（100%）按1:10加于含金黄色葡萄球菌培养液中，30分钟后即有杀菌作用。氯仿提取物有抗内毒素作用。
蓼蓝叶煎剂5g/kgig，可使大鼠甲醛性脚肿减轻或消退加速。蓼蓝叶煎剂10g/kgig家兔，可抑制二甲苯引起的局部皮肤炎性反应，降低毛细血管通透性。
4.利胆作用：大青叶对狗有明显增加胆汁分泌的作用;5.抗炎作用：大青叶(菘蓝)煎剂大白鼠灌胃,对于甲醛性关节炎骨明显的抗炎作用。
6.对机体防御机能的影响:小鼠ip葡萄球菌后，ig蓼蓝叶煎剂10g/kg，可增强腹腔中白细胞对细菌的吞噬作用，提高吞噬指数。
7.对心、血管系统的作用:蓼蓝叶煎剂（相当生药0.125g）对离体蟾蜍心脏有抑制作用，作用随剂量增加而增大，甚至可使心脏停搏。对大鼠下肢血管有扩张作用，当血管呈收缩状态时，扩张作用尤为明显。
8.对平滑肌的作用:浸剂及注射剂对离体兔肠肌有抑制作用，肠蠕动减弱，振幅减小，且持续时间较长，不易自行恢复，其抑制作用随浓度的增加而加强。蓼蓝叶煎剂对离体豚鼠子宫平滑肌有兴奋作用。小剂量（0.1g）产生有力的节律性收缩，剂量增加至0.25g时，呈强直性收缩，持续时间较久。
9.对血小板聚集的作用: 本品所含的pt-1、pt-2可抑制用ADP（Adenosinediphosphate）所引起的血小板聚集作用。