2017-09-20鸦胆子

鸦胆子
一、鸦胆子药典标准     本品为苦木科植物鸦胆子 Brucea javanica（L.）Merr.的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收，除去杂质，晒干。
    【性状】本品呈卵形，长6～10mm，直径4～7mm。表面黑色或棕色，有隆起的网状皱纹，网眼呈不规则的多角形，两侧有明显的棱线，顶端渐尖，基部有凹陷的果梗痕。果壳质硬而脆，种子卵形，长5～6mm，直径3～5mm，表面类白色或黄白色，具网纹；种皮薄，子叶乳白色，富油性。气微，味极苦。
    【鉴别】 （1）本品果皮粉末棕褐色。表皮细胞多角形，含棕色物。薄壁细胞多角形，含草酸钙簇晶和方晶，簇晶直径约至30μm。石细胞类圆形或多角形，直径14～38μm。种子粉末黄白色。种皮细胞略呈多角形，稍延长。胚乳和子叶细胞含糊粉粒。
    （2）取本品粗粉1g，加石油醚（60～90℃）20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液补加石油醚（60～90℃）至20ml，作为供试品溶液。另取鸦胆子对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取油酸对照品，加石油醚（60～90℃）制成每1ml含3mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各1～3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-冰醋酸（8.5：1.5：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
    【检查】 杂质 不得过2.5%（通则2301）。
    水分 不得过10.0%（通则0832第二法）。
    总灰分 不得过6.5%（通则2302）。
    【含量测定】 照气相色谱法（通则0521）测定。
    色谱条件与系统适用性试验 聚乙二醇20000（PEG-20M）毛细管柱（柱长为30m，内径为0.25mm，膜厚度0.25μm）；检测器温度为250℃（FID）；进样口温度为250℃；柱温为205℃；分流比为20：1。理论板数按油酸峰计算应不低于5000。
    校正因子测定 取油酸对照品适量，精密称定，加正己烷制成每1ml含3mg的溶液。精密量取5ml，置10ml具塞试管中，用氮气吹干，加入0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液2ml，置60℃水浴中皂化25分钟，至油珠全部消失，放冷，加15%三氟化硼乙醚溶液2ml，置60℃水浴中甲酯化2分钟，放冷；精密加入正己烷2ml，振摇，加饱和氯化钠溶液1ml，振摇，静置，取上层溶液作为对照品溶液。精密称取苯甲酸苯酯适量，加正己烷制成每1ml含8mg的溶液，作为内标溶液。精密量取对照品溶液和内标溶液各1ml，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，计算校正因子。
    测定法 取本品粗粉约3g，精密称定，加入石油醚（60～90℃）30ml，超声处理（功率280W，频率42kHz）30分钟，滤过，滤液置50ml量瓶中，用石油醚（60～90℃）15ml，分次洗涤滤器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加石油醚（60～90℃）至刻度，摇匀。精密量取3ml，自“置10ml具塞试管中，用氮气吹干”起，同对照品溶液制备方法制备供试品溶液。精密量取供试品溶液和内标溶液各1ml，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含油酸（C18H34O2）不得少于8.0%。
    饮片
    【炮制】 除去果壳及杂质。
    【性味与归经】 苦，寒；有小毒。归大肠、肝经。
    【功能与主治】 清热解毒，截疟，止痢；外用腐蚀赘疣。用于痢疾，疟疾；外治赘疣，鸡眼。
    【用法与用量】 0.5～2g，用龙眼肉包裹或装入胶囊吞服。外用适量。
    【贮藏】置干燥处。


二、鸦胆子化学成分
鸦胆子含30余种结构上类似苦木素（quassin）的具抗癌活性的苦味成分：鸦胆子苦素（bruceine）A、鸦胆子苦素B、鸦胆子苦素C、鸦胆子苦素D、鸦胆子苦素E、鸦胆子苦素F、鸦胆子苦素G、鸦胆子苦素H、鸦胆子苦素I，鸦胆子苦醇（brusatol），去氢鸦胆子苦醇（dehydrobrusatol），去氢鸦胆亭醇（dehydrobruceantinol），去氢鸦胆子苦素（dehydrobruceine）A、B，二氢鸦胆子苦素（dihydrobruceine），鸦胆亭（bruceantin），鸦胆亭醇（bruceantinol），鸦胆子酮酸（bruceaketolic acid），鸦胆子苦素E-2-葡萄糖甙（bru-ceine E-2-β-D-glucopyranoside，yadanzigan），鸦胆子苦烯（bruceene），鸦胆子苦内酯（yadanziolide）A、B、C、D，鸦胆子苷A（yadanzioside）、鸦胆子苷B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、M、N、O、p，鸦胆子苦苷（bruceoside）A、B，鸦胆子双内酯（javanicin）等。还含黄花菜木脂素A（cleomiseosin A），4-乙氧甲酸基喹诺-2-酮（4-ethoxycarbonyl-2-quinolone），香草酸（vanillic acid），金丝桃苷（Hyperoside），木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖甙（luteolin 7-O-β-D-glu-coside），胡萝卜苷（daucosterol）。又含油（鸦胆子油），内有具抑癌活性的油酸（oleic acid）和非活性成分：三油酸甘油酯（TCMLIBiolein）等。

三、鸦胆子药理作用
1.抗寄生虫作用：1.1．鸦胆子的抗变形虫活性和细胞毒作用： 体外测定了鸦胆子丁醇粗提物和鸦胆丁、鸦胆子苦素C对痢疾变形虫（Entamoebahistolitica）的活性以及对豚鼠耳角质化细胞（GPK）的细胞毒作用。
1.2．去油鸦胆子水浸液和乙醚浸膏加入阿米巴感染粪便，均能杀灭阿米巴。鸦胆子甙（Yadanoside）在阿米巴培养基中杀阿米巴的效力相当于吐根素的1/5-1/10。
1.3．抗疟作用：1.3.1.鸦胆子粗提物及有效成分对恶性疟原虫耐药株的体外抗疟作用： 采用形态学方法测定鸦胆子四种溶剂粗提物对恶性疟原虫的体外抗疟活性，结果显示氯仿提取物的活性最强。从鸦胆子氯仿提取物中分离纯化得到3个化合物：鸦胆子苦素A、鸦胆子苦素B水合物和鸦胆子苦素C。测定了这3个化学成分对自然分离的恶性疟原虫株的体外抗疟活性，结果鸦胆子苦素A和鸦胆子苦素B水合物的抗疟活性相似（ID50为 8.66和8.15ng/ml），而鸦胆子苦素C的抗疟活性较高（ID50为1.95ng/ml），与新抗疟药甲氟喹（ID50为 6.26ng/ml）相比有显着差异（P<0.041）。
1.3.2.鸦胆子苦木素类成分对恶性疟原虫抗氯喹株的作用： 测定了一系列鸦胆子苦木素类成分在体外对耐氯喹恶性疟原虫株的活性，其中9个成分IC50<0.05μg /ml，两个苦木素类糖甙：YadanziosideF和I和体外抗疟活性大大地小于其配糖基鸦胆子苦素B。又测定了鸦胆子不同溶剂粗提物和某些苦木素类成分对小鼠感染疟原虫的寄生虫血症的抑制作用。结果表明，小鼠口服给药后，氯仿和正丁醇提取物有较高的活性和毒性，鸦胆子苦素A、C、D和鸦胆子苦醇小鼠口服后对疟原虫感染有抗疟活性，但上述4个苦木素类成分和鸦胆子苦素B在小鼠在体试验中均显示一定毒性。
1.3.3.测定Buceoside-A和鸦胆子苦醇及Bruceolide对恶性疟原虫耐氯喹株的体外抗疟活性结果显示鸦胆子苦醇有较高的抗疟活性（半数有效量＝7.58ng/ml），Bruceoside A 没有活性（半数有效量＝581.14ng/ml），Bruceoliole活性极小（半数有效量＝75.20ng/ml）。
1.3.4.抗其它寄生虫作用： 鸦胆子粗提物能驱除犬肠道线虫和条虫。对钩虫有极强的驱杀作用。从鸦胆子仁提得的一种苦味配糖体，在体外1：10000 浓度时，能在24小时内杀死肺吸虫成虫。对滴虫、草履虫和尿路原虫都有杀灭作用。5-10%冷浸液与蚊幼虫和卵接触18-48小时，可全部杀死之。
2.抗肿瘤作用：2.1．10%鸦胆子油静脉乳抗肿瘤作用：2.1.1.小鼠体内抗癌作用：2.1.1.1.对艾氏腹水癌的作用： 小鼠体重20±0.5g，每组10只，接种艾氏腹水癌后次日给药。两个给药组分别腹腔注射鸦胆子静脉乳2.5g/（kg.天）×7天、5.0g/（kg．天）×7天，并设对照组，停药后观察动物45天内生存天数，计算生命延长率。结果表明，两个剂量给药组平均生存天数均显着长于对照组（P均< 0.001）。
2.1.1.2.对实体瘤S37、S180的作用：小白鼠体重20±0.5g，右前肢腋部皮下接种癌细胞悬液，每组10只，接种次日起每天于肿瘤局部给药2.5g/（kg.天）×7天，给药后15天处死动物，记录体重，肿瘤重量，计算肿瘤抑制率。结果表明鸦胆子油静脉乳对小鼠实体瘤S37、S180均有一走的抗癌作用。
2.1.2.体外抗癌作用： 用1.25%的鸦胆子静脉乳与艾氏腹水癌细胞体外培养1、3小时，伊红染色法的赤染率都为100%。形态法实验结果鸦胆子静脉乳对癌细胞的损伤为膜变性、膜破裂和核固缩等，表明鸦胆子油静脉乳对艾氏腹水癌细胞肝癌腹水型癌细胞有直接损害作用。经小鼠精原细胞法证明鸦胆子油静脉乳尚有抑制小鼠精原细胞有丝分裂的作用。
2.2．鸦胆子油乳剂对艾氏腹水癌细胞的杀伤动力学效应：采用放射自显影方法观察中10%鸦胆子油乳剂对接种7天的艾氏腹水癌小鼠S期、G2期和Go期细胞的影响。S期杀伤结果表明，给药后8小时，S期及非S期细胞损伤均呈高峰，但S期细胞的损伤百分率较非S期高。标记指数（LI）在2小时后明显下降，24小时时LI下降为5.2%，表明给药时处于S期的细胞大部分被药物破坏。经3H一TdR标记后，再用秋水仙酰胺阻断的实验表明，给药组标记分裂指数（PLM）上升幅度与对照组比较明显下降。由于药物处理时几乎未见损伤的M期细胞，并可见有丝分裂各期的细胞，所以经药物处理后MI无明显上升并非药物直接损伤M期细胞所致，说明鸦胆子油乳剂可以抑制或损伤G2期细胞，从而减少及延长G2期细胞进入M期。用连续标记方法确定Go期细胞为47.8%，给药后5小时，Go期细胞损伤率为17%，说明鸦胆子油乳剂对Go期细胞亦有一定杀伤作用。经放射自显影证实，鸦胆子油乳剂对3H一TdR参入DNA生物合成有明显的抑制作用，给药后0.5小时, LI为11%，24小时LI为33%，表明药物对艾氏腹水癌细胞呈可逆性抑制。
3．抗白血病作用：鸦胆子含苦木素类糖甙BrnceosideA、B、YadanziosidesA-H、Yadanziosides F、I、J、L、P显示有抗白血病活性。鸦胆子苦醇对P－388白血病显示有效的抗白血病作用（小鼠腹腔注射0.125mg/kg/天，T/C=158），CleomiscosinA在体外对P-388淋巴性白血病有活性（半数有效量＝0.4μg/ml）。
4．抗其它肿瘤作用：甲基胆蒽醋酮诱发的小鼠皮肤癌和乳头状瘤进行试验，证明鸦胆子仁糊剂和水剂局部应用，能使瘤细胞发生退行性变和坏死。但对正常组织亦有类似作用。鸦胆子苦醇在0.5mg/kg时，对小鼠S180瘤株有边缘活性。