2017-06-14土荆皮

土荆皮
一、土荆皮药典标准     本品为松科植物金钱松Pseudolarix amabilis（Nelson）Rehd.的干燥根皮或近根树皮。夏季剥取，晒干。
    【性状】根皮 呈不规则的长条状，扭曲而稍卷，大小不一，厚2～5mm。外表面灰黄色，粗糙，有皱纹和灰白色横向皮孔样突起，粗皮常呈鳞片状剥落，剥落处红棕色；内表面黄棕色至红棕色，平坦，有细致的纵向纹理。质韧，折断面呈裂片状，可层层剥离。气微，味苦而涩。
    树皮 呈板片状，厚约至8mm，粗皮较厚。外表面龟裂状，内表面较粗糙。
    【鉴别】（1）本品粉末淡棕色或棕红色。石细胞多，类长方形、类圆形或不规则分枝状，直径30～96μm，含黄棕色块状物。筛胞大多成束，直径20～40μm，侧壁上有多数椭圆形筛域。黏液细胞类圆形，直径100～300μm。树脂细胞纵向连接成管状，含红棕色至黄棕色树脂状物，有的埋有草酸钙方晶。木栓细胞壁稍厚，有的木化，并有纹孔。
    （2）取本品粉末lg，加甲醇20ml，超声处理20分钟，放冷，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取土荆皮对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取土荆皮乙酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（14：4：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的荧光斑点。
    【检查】水分 不得过13.0%（通则0832第二法）。
    总灰分 不得过6.0%（通则2302）。
    酸不溶性灰分 不得过2.0%（通则2302）。
    【浸出物】照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，用75%乙醇作溶剂，不得少于15.0%。
    【含量测定】照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验 以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1%醋酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为260nm。理论板数按土荆皮乙酸峰计算应不低于5000。
    对照品溶液的制备 取土荆皮乙酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含45μg的溶液，即得。
    供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含土荆皮乙酸（C23H29O8）不得少于0.25%。
    饮片
    【炮制】洗净，略润，切丝，干燥。
    本品呈条片状或卷筒状。外表面灰黄色，有时可见灰白色横向皮孔样突起。内表面黄棕色至红棕色，具细纵纹。切面淡红棕色至红棕色，有时可见有细小白色结晶，可层层剥离。气微，味苦而涩。
    【检查】总灰分 同药材，不得过5.0%。
    【鉴别】【检查】（水分 酸不溶性灰分）【浸出物】【含量测定】同药材。
    【性味与归经】辛，温；有毒。归肺、脾经。
    【功能与主治】杀虫，疗癣，止痒。用于疥癣瘙痒。
    【用法与用量】外用适量，醋或酒浸涂擦，或研末调涂患处。
    【贮藏】置干燥处。
 
二、土荆皮化学成分
   根皮含土荆皮酸（pseudolaricacid）A、土荆皮酸B、土荆皮酸C、土荆皮酸D、土荆皮酸E，土荆皮酸C2即是去甲基土荆皮酸（demethylpseudolaricacid）B,土荆皮酸A-β-D-葡葡糖甙（pseudolaricacidA-β-D-glu-coside），土荆皮酸B-β-D-葡萄糖甙（pseudolaricacidB-β-D-gluco-side），金钱松呋喃酸（pseudolarifuroic），白桦脂酸（betulinicacid）,β-谷甾醇（β-sitosterol），β-谷甾醇-β-D-葡萄糖甙（β-sitosterol-β-D-glucoside）。种子含土荆皮内酯（pseudolarolide）E、H，以及土荆皮内酯A、B、C、D、I。树轮中含铅、铁、钙、锰、锌五种无素。


三、土荆皮药理作用
1.抗真菌作用。取0.2cm的石膏样癣菌菌落移种于Sabourand氏葡萄糖琼脂培养基上，3wk后切直径<0.2cm的菌落接种于40%土荆皮药液培养基及对照培养基中，各接种3管，25℃培育2h，然后按常规处理制成超薄切片，用电镜观察，土荆皮有很强的抗真菌作用，细胞损伤程度在药物浓度与刘量相同情况下与药物作用时间长短有关，若真菌充分暴露，药物浓度足够时，有100%杀灭细胞作用。土荆皮与二性霉素B等抗真菌剂对白色含珠菌的作用相比较，其相同点为细胞浆内均有电子薄区，细胞膜完整，并反折入胞浆内。不同点在于土荆皮作用的真菌细胞结构变性，细胞器消失，细胞膜明显皱缩，并呈憩室样反折入胞头，线粒体结构亦变性乃至消失。土荆皮中抗真菌的主要成分为土荆甲酸、土荆乙酸、土荆丙酸。

2.土荆乙酸苷对培养人体肝癌细胞的作用以人体肝癌细胞株SMMC-7721培养于含30%小牛血清的RPMI-1640培养液，将生长茂密的单层细胞制成县液，以相等的细胞数接种于培养瓶，于37℃培养2d供实验用，以人体两倍体细胞2BS作对照观察。土荆乙酸甙用3.5%吐温80制成针剂(20mg/ml)，实验时用上述培养液配成土荆乙酸甙浓度为10ug、5ug和265ug/ml3组，分别加入准备好细胞的培养瓶中继续培养。观察加药后24h；培养6d;加药后48h等，计数各组总细胞数和死细胞数，求出药物对细胞的杀伤率。结果表明，瘤细胞形态与对照组比较，土荆乙酸甙10和5ug/ml的两组，大部分细胞变圆，胞膜变厚皱缩，且均脱落呈悬浮状，仅见少数细胞贴壁生长；10、5、2.5ug/ml3组对肝癌细胞生长有不同程度抑制作用，10ug/ml作用d6起，对细胞增殖有较明显的抑制作用，其抑制率分别为56.7%、55.1%和56.2%，10ug/ml组d6时增殖抑制率达96.9%；各组细胞冻融液的蛋白质含量随土荆乙酸甙浓度递增而蛋白质含量的抑制率增高，当土荆乙酸甙剂量为10ug/ml时，其抑制率达64.54%；土荆乙酸甙浓度为10、5和2.5ug/ml时，对细胞杀伤率分别为42.9%、39.3%和29.4%，对照组仅8.3%细胞死亡。

3.抗生育作用
 3.1抗早孕作用成年雌大鼠，体重200±SD22g，成年大鼠，体重330±40g，自由饮水和进食，光照7：00am一7：00pm，雌雄按2：1合笼，每日8：00阴道涂片，以查到精子为妊娠dl，孕鼠每组10只，于妊娠d7，8，9ig给药，药后d6解剖，凡有一个或一个以上正常胎仔作为妊娠动物。对于妊娠仓鼠，土荆甲酸60mg/kg与对照组相比较有非常明显的抗早孕作用(P＜0.01＝，而土荆乙酸20-40mg/kg有明显的抗早孕作用(P＜0.05或P＜0.01＝。土荆乙酸30-40mg/kgqdx3d给兔sc和iv溶液，抗早孕效果较ig混悬液40mg/kgqdx3d为好。土荆乙酸给孕狗，于妊娠14d内ig混悬液，停药后d6剖检胎仔，1mg/kqqdx3d，4只狗中有2只早孕终止，宫腔内胎仔全部死亡，另2只狗各有4个活胎，剂量5mg/kgqdx3d，4只狗的早孕全部终止，胎仔死亡。给2只狗单次ig混悬液20-30mg/kg，胎仔亦全部死亡。土荆乙酸的抗早孕作用可能首先损伤母体的蜕膜部分，且蜕膜坏死不是由于孕酮下降的缘故，实验表明外源性孕酮不能对抗其抗早孕作用。

   3.2土荆乙酸对妊娠大鼠无明显的抗着床作用，对妊娠dl0-12，ig给于大鼠土荆乙酸10mg/kgqdx3d可终止中期妊娠(P＜0.01)。