2017-06-14土贝母

土贝母
一、土贝母药典标准     本品为葫芦科植物土贝母Bolbostemma paniculatum（Maxim.）Franquet的干燥块茎。秋季采挖，洗净，辦开，煮至无白心，取出，晒干。
    【性状】本品为不规则的块，大小不等。表面淡红棕色或暗棕色，凹凸不平。质坚硬，不易折断，断面角质样，气微，味微苦。
    【鉴别】取本品粉末0.1g，加70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取土贝母苷甲对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水（12：3：8：2：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以醋酐-硫酸-乙醇（1：1：10）混合溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
    【检查】水分 不得过12.0%（通则0832第二法）。
    总灰分 不得过5.0%（通则2302）。
    【浸出物】照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于17.0%。
    【含量测定】照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（65：35）为流动相；检测波长为214nm。理论板数按土贝母苷甲峰计算应不低于1500。
    对照品溶液的制备 取土贝母苷甲对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
    供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，水浴蒸至无醇味，加水10ml，移置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取4次（20ml，20ml，10ml，10ml），合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含土贝母苷甲（C63H98O29）不得少于1.0%。
    【性味与归经】苦，微寒。归肺、脾经。
    【功能与主治】解毒，散结，消肿。用于乳痈，瘰疬，痰核。
    【用法与用量】5～10g。
    【贮藏】置通风干燥处。

二、土贝母化学成分
   鳞茎含三萜皂苷：土贝母苷（tubeimoside)Ⅰ、土贝母苷Ⅱ、土贝母苷Ⅲ、土贝母苷Ⅳ、土贝母苷Ⅴ[1-4]。还含△7,16,25,(16)-豆甾三烯醇（△7,16,25,(26)-（stigmastatrienol),麦芽醇（maltol([5]，麦芽糖（maltose)，蔗糖（sucrose)[6].

三、土贝母药理作用
1.抗肿瘤作用
    1.1土贝母粗粉用氯仿冷浸，滤过，残渣用75%乙醇冷浸，乙醇提取液经回收乙醇后用乙酸乙酯萃取，萃取后的母液用正丁醇萃取，萃取后母液室温放置1wk，析出白色物质，抽滤后得白色粉状物，经硅胶层析，用氯仿-甲醇-水（70：35：10）洗脱，分别得C，DC结晶），E三部分。经小鼠接种-180后作抑瘤试验，ip给药，正丁醇萃取后母液（7.5mg/kg），白色粉状物（2.5mg/kg）结晶Ｄ（2.5mg/kg）均有明显的抑痛作用，抑瘤率>30%，P＜0·001。结晶D对带瘤、、鼠的生存期有明显作用；取健康、体重18-24g小鼠，腹腔接种艾氏腹水癌或S-180，接种24h后，治疗组im结晶D生理盐水溶液，每日1次，直至小鼠开始死亡为止，对照组给于生理盐水。

     1.2土贝母煎剂对小鼠宫颈癌的抑制作用山西医学院肿癌研究组用改进的Murphy氏法基础上加以改良，建立小鼠宫颈癌模型。进行土贝母等的筛选。土贝母用水煎剂（1:1浓度）剂量100mgig给药，连续15wk,土贝母治疗组15只小鼠，实验结束后处死。肉眼可见8只有肿瘤，位于子宫颈处，镜检：8只为宫颈鳞癌，余未见，诱癌率为53%，存活率为75%,与对照组比较P＜0.05，差异显着（对照组诱癌率为85%）。提示土贝母水煎剂对小鼠宫颈癌治疗上不仅有一定的抑制率，且能提高其存活率。

     1.3土贝母煎剂对小鼠前胃鳞癌的影响土贝母对小鼠前胃鳞癌具有促进作用。土贝母经山西省药品检验所鉴定品种，制剂为水煎剂，每lml相当生药2g，雌性小鼠诱癌方法采用肌氨酸乙脂盐酸盐2g/kg和亚硝酸钠0.3g/kg，分别用0.01mol/L盐酸配成20%和3%水溶液，等量混合ig给药，每周2次，共10次；土贝母对照组用剂量为50mg/kg，每周ig4次，共20次，土贝母治疗组在灌喂10次致癌物后，给土贝母50mg/kg，每周ig4次，连续20次，结果用X2检验，土贝母治疗组与致癌组和土贝母对照组比较均有显着性差异。从实验结果表明，土贝母水煎剂对小鼠前胃鳞癌不但无抑制作用，且可能具促癌作用、实验重复两次，结果相同。与其他报道有抗肿瘤作用结果相反，可能剂型等不同对实体瘤和诱发瘤均有不同的影响。

     1.4土贝母甙甲对动物肿瘤亦有一定的抑制作用。

2.抗病毒作用土贝母皂甙（原文未注明是那一种皂甙），西安医学院二附院制（批号820624）配制成每1ml含1mg的皂甙溶液。将皂甙溶稀成不同浓度（10-7-10-1mg/ml），同时将单纯疱疹病毒I（HSV-I）TCLD50作10-1稀释后进行击。各项不同浓度药液与稀释的病毒各0.5ml混合后于37℃温孵lh。每个稀释度接种3管乳兔肾细胞，吸附30min，加维持液至1ml，置36℃温箱培养，3种材料均设对照管。结果土贝母皂甙稀释浓度为10-4/10-5（即0.1ug）时对单纯疱疹病毒I型仍有抑制作用。10-6浓度以下无抑制活性，浓度1O-3以上对细胞毒性较大。

3.溶血作用西安医学院二附院药剂科从土贝母中用稀醇冷浸，水沉淀，氧仿、正丁醇萃取，氧化铝柱层析分离精制而得的白色粉末，称为土贝母总皂苷，按广州药品检验所《中草药制剂检验技术》中的溶血试验法测定，结果土贝母总皂甙的溶血指数为1:1.064x10?。

4.杀精子作用西安医科大学附属医院药厂制备的土贝母总皂甙及其A、D成分均有较强的杀精作用，其瞬间杀精作用的有效浓度分别为0.04%，0.04%和0.03%，其杀精机理主要是破坏精子的生物膜系统，用固定明胶底物薄膜法测定单个精子顶体酶变化的结果表明，3种成分在浓度0.05%时均可显着降低单个精子顶体酶的活性。且作用后不活动的精子用生理盐水洗去药液后活动力未能恢复，表明其损伤作用是不可逆的。

5.其他作用本品曾用作为治疗乳腺炎、毒蛇咬伤的解毒剂。土贝母甙甲、乙、丙具有助溶作用和包合作用，能增加脂溶性色素YellowOB，消旋-a-生育酚和无患子中的皂甙A等在水中的溶解度；土贝母甙甲还能增加苯胺-荼-磺酸盐萤光素在水中的强度，可能是形成复杂的包合作用之故。